Quidel 集团于 2017 年通过收购，将美艾利尔（Alere）公司 Triage 心血管及毒理检测产品收入麾下。 特别是心脏标志物检测，作为 POCT 检测技术的领导者，Triage 在市场上经历了 20 多年的积累沉淀，通过检测试剂板微流控技术的升级优化，不断提高检测性能，依然占有很高的市场份额。 今天，我们就来解密一下 Triage 检测仪器的荧光染料能量转移系统以及 Triage 检测试剂板的构造。看看这张小小的检测卡片上，蕴藏着怎样的奥秘！
简介
Quidel Triage 检测系统，是一个定量的 POCT 免疫分析系统，可测量血液中的多种检测项目。在中国上市的检测试剂包含：
多重检测板：
● 心肺五项联合检测（TNI CKMB MYO BNP D-Dimer）
● 心肌三项联合检测（TNI CKMB MYO）
● 心脏二联检测
单独检测板：
● 肌钙蛋白 I 检测（TNI）
● B 型脑钠肽检测（BNP）
● D - 二聚体检测（D-Dimer）
● 胎盘生长因子（PLGF）
其他未在国内上市的产品有：
● 毒理相关检测
● 超敏肌钙蛋白检测（Triage True hs-TnI，中国注册中）
Triage 检测系统及检测板被定义为床旁快速检测设备（POCT），帮助临床医生快速获得检测结果，用于评估心力衰竭，急性冠脉综合征，胸痛及呼吸困难。 Triage 检测系统由检测仪器 Triage MeterPro 以及一次性检测试剂板组成，该检测系统由 Quidel 集团开发并取得专利（Quidel 于 2017 年从 Abbott 手中通过收购，获得 Alere Triage 产品线和其技术专利），Triage 检测系统广泛销售至世界各地。
产品特性
● Triage 检测系统使用便捷，可应用在中心实验室及床旁检测（POCT）
● 检测板可在 15 分钟内，同时检测全血或血浆样本中多项生物标记物。同时检测多种标志物，更好的帮助临床医生识别复杂疾病，往往有着复杂的病因，并且会随着时间变化。
● 检测系统设置了终点检测，这样检测板就可以自动运行检测，而不依赖仪器。这样就可以使用一台检测设备在一小时内同时检测多份血液样本，提高检测效率。
● 肌钙蛋白 I 检测测量的被氧化和衰减的形式，游离 TNI,TNI/C, TNI/T,TNI/C/T。检测板经过精心的设计，因此，每种 TNI 的形式都可以被检测出从而保证结果准确。这也保证 TNI 的检测结果不依赖于其在样本中的存在形式。
● 检测系统有测试板内部质控，外部质控，当质控失败后程序停止运行。
荧光染料能量转移系统
通过荧光染料的能量转移系统，产生了 670nm 的激发波和 760nm 的发射波。这样的波长，降低了来自血浆的散射干扰、本底吸光度和自发荧光。荧光染料以最佳浓度嵌入乳胶颗粒中，形成荧光乳胶颗粒（荧光能量转移乳胶，FETL）完成荧光能量转移。荧光染料是硅酞菁的衍生物（见图 1）。
受体染料是一种杂化硅酞菁衍生物，具有酞菁和萘菁染料的亚基特性。硅取代染料与硅氧基脂肪族轴向配体衍生，使其横向于芳香环体系的平面结构。轴向配体通过空间效应减少了粒子中染料的堆积，因此，染料的猝灭不会导致荧光产率的降低。90nm 的斯托克斯位移使得测量仪可使用简单的光学器件即可。硅酞菁染料具有较好的光稳定性，并表现出较高的量子和能量转移效率。
图 1 荧光能量染料系统
试剂检测板内部结构解密
试剂检测板由底座、血液过滤器、盖子和标签组成（图 2）。底座和盖子通过超声方式结合，形成一系列的精细毛细管，样本在毛细管中流动。底座和盖子的不同表面纹理，控制着样本在检测板中的移动。基于检测板的模塑构造，利用毛细作用控制液体流动，是试剂检测板的一个独有特性。
图 2 试剂检测板
图 3 所示为试剂检测板俯视图
在加样区加入血样后，血样进入过滤器，通过过滤器中的横向流动将红细胞与血浆分离。血浆离开过滤器并进入称为样本反应屏障 (SRB) 的高毛细作用区域。 SRB 有助于形成反应室 (RC) 的容积。在 SRB 所构筑的屏障内布满细槽，这些细槽可促使样本在毛细作用下流动至 RC，液体从 SRB 的高毛细作用区域流至 RC 的低毛细作用区域。 样本进入并填充 RC，由于时控闸门（TG）的作用，液体流动在 RC 内暂停。由于液体暂停流动，样本中的待测物质可以和 RC 中的荧光抗体复合物结合反应，形成反应复合物。时控闸门能够延迟流体通过检测板，是由于 TG 的表面是疏水性的。样本中的蛋白质结合在疏水表面上，将其变为亲水性。 蛋白质的结合速度和表面的相对疏水性决定了反应混合物在 RC 中的温育时间。这个时间通常为 2 分钟，但会随着 TG 表面相对疏水性的变化而改变。随后，反应复合物从 TG 流出，进入检测通道。TG 的表面变为亲水性，这个变化使得样本可以畅通的流过检测通道。 检测通道（DL）上，抗体被固定在独立的检测区域上。这些检测区域包含了高值和低值的阳性质控，一个阴性质控以及待测物对应的抗体。 随着样本流过检测通道，已经与荧光抗体结合的待测物复合物，被各自区域的固定抗体捕获，形成抗体 - 抗原 - 抗体复合物。 足量的血浆样本，将未结合的荧光复合物从检测通道冲洗出去。通过废液池的毛细作用冲刷下来的液体，填满检测试剂板的周围。检测通道（DL）上的荧光强度，与分析物的浓度成正比。
图 3 检测板俯视图
图 4 展示了电子显微镜下的表面结构
样本反应屏障（SRB）中的表面纹理及较高毛细作用保证了样本在进入反应区前，均匀的分布在毛细管中。 反应区的纹理结构，使检测试剂在试剂板生产过程中能够在反应区均匀干燥的分布，这有助于样本反应完全。 时控闸门中的细槽，确保液体前沿与液体流向垂直，从而减小了时控闸门中的气泡，确保时控闸门定时开放。 时控闸门的凹点（TGP）确保了样本进入检测通道（DL）部位相同，先流入的样本由此进入毛细管。 检测通道（DL）和废液池的纹理设计，促使样本均匀的流过长毛细管。在此过程中，荧光颗粒在检测区与相应抗体结合，未结合的荧光颗粒流入废液池。
图 4 表面结构
通过以上 Triage 检测试剂板构造解密，不难看出 Triage 检测板在构造上使用了微流控技术，通过精心的设计，保证了样本能够按照既定的通路均匀流动，从而达到充分的反应。
Quidel 在收购了 Triage 产品线之后也继续扩大研发力度，最新的微流控技术使得在 POCT 设备上得以实现超敏肌钙蛋白（hscTn）检测。
Quidel Triage True hs-TnI 于 2018 年获得 CE 认证，我们也期待尽快将产品引入中国，帮助中国的医生和患者，能够更加快速的获得超敏肌钙蛋白结果，更早期的识别心肌损伤。
来源： 快臻Quidel床旁诊断 ------------------------------------------------------------------------------
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发表于 2021-6-25 22:23:04
