从美国CDC犯的错，看如何生产合格的新冠检测试剂盒？

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近日，据媒体揭露，美国CDC因实验室污染问题导致其生产出新冠检测“残次品”试剂盒，之后又花费一个多月的时间做出改良，使得美国迟迟无法开展大量检测，痛失防疫的黄金时期。这一丑闻引发轩然大波，被媒体称作“CDC74年历史上的重大污点”。

为什么会出现新冠检测“残次品”？

根据FDA对该事件的调查以及各方专家置评，CDC出现的问题表现在试剂盒中的阴性对照测出了阳性结果，而纠察原因都指向了一个核心污染源——CDC新冠试剂盒的制造和组装。

在此之前，先来看一套完整新冠检测试剂是如何构成的。一套完整的新冠检测试剂盒通常包含5个组成部分，核酸扩增反应液，酶混合液，引物探针，阳性对照，阴性对照。而据媒体报道，美国CDC的新冠试剂盒，不同于常规的5个组分，而是由3个组分构成，其将表1中的组分1-2-3做成1管混合液，组分4同样使用新冠病毒假病毒作为阳性对照，而组分5阴性对照则做了改变，没有使用生理盐水作为阴性对照，而是使用一种包含SARS-CoV，MERs-Cov等的泛冠状病毒片段作为阴性对照。

表1 新冠试剂盒常规组分

序号	组分	主要成分
1	酶混合液	热启动Taq酶、逆转录酶、RNase inhibitor、UDG酶等
2	核酸扩增反应液	镁离子、dNTP、dUTP等
3	引物探针	新冠病毒和内参的引物、探针
4	阳性对照	假病毒等
5	阴性对照	生理盐水等

从设计上来说，CDC使用泛病毒片段的阴性对照，使得试剂盒可以增强区分covid-19和其他冠状病毒株的可靠性，这一点本身无可厚非，但在疫情初期检测速度是第一位的，额外增加不必要的组分只会给生产制造和一线检测带来麻烦，而事实也证明，被污染的就是这个阴性组分。设计出炉后，CDC并没有将生产工作交给专业的公司去做，而是非常不专业的选择在它的一个实验室中开始生产，并且在生产过程中并没有遵守相应生产操作规程，出现了诸多低级错误。譬如，在同一实验空间内同时进行化学混合物组装和冠状病毒材料处理，进出实验没有更换衣服和有效消毒，以及没有委派任何专门的负责人来管理全局等。这些低级错误造成的试剂盒不达标，使得美国在防疫初期缺乏检测手段，导致新冠病毒在美国的灾难性蔓延。

如何生产合格的新冠检测试剂盒？

生产合格的新冠检测试剂盒，乃至所有的体外诊断类产品，良好的生产体系、质量控制体系以及有效的监督管理体系，三者缺一不可。

良好生产体系要求新冠检测试剂盒生产企业首先应获得《医疗器械生产许可证》并通过《体外诊断试剂生产企业质量管理体系考核评定标准（试行）》的考核。除满足标准的通用要求外，企业还应建设与工艺要求相适应的人员、环境、设施设备等条件，如相互独立的准备区、制备区、扩增区、分析区，单向的区域间工艺流、物流、人流与气流，10万级GMP标准洁净生产车间，局部百级环境等，最大程度避免差错和交叉污染。


质量控制体系，包含原料控制、产品质量控制等多个方面。原料是产品的源头，源头不合格，就根本谈不上终产品的质量。产品生产首先应选择具有规模化生产能力的原料企业，挑选性能好的原料。譬如选择用封闭效率只有90%的Anti-Taq抗体原料，和选择用封闭效率100%的Anti-Taq抗体原料所生产的试剂盒，在灵敏度上会有非常大的差异性，进而导致临床误检率的提高；另外，新冠等核酸检测类试剂使用的包材和耗材还应注意无DNase和RNase的污染。产品质量控制应包含半成品和成品质量控制等方面，以参考品/对照品进行对照品符合率、灵敏度、特异性、精密度的检定。

正常企业为自己的产品质量负责，从产品风险着手，建立质量体系，监督管理体系则要求监督部门专心做好、监督检查。企业应定期进行内审，认真核查质量体系是否存在缺钱，并针对每一缺陷项对整改和跟进措施要记录、分析，应及时进行状态的更新，有效控制产品的质量，不断完善体系的科学性和有效性。更为重要的是，监督管理体系的负责人应严格遵守质量为先原则，在利润与质量的天平上，永远坚持站在质量这边。


结语：

这次新冠疫情中，IVD行业中的每家企业都希望能竞争到新冠检测的业务，做这项业务不仅可以带来销售额，也可以很快在业内获得认可，可谓“名利双收”，因此在疫情开始初期，各家都开足马力拼研发速度、拼注册速度、拼宣传速度、拼销售速度，但是随着时间的推进，你会发现只有拥有优秀的生产、质控、监督管理体系的企业，才可以在疫情中快速通过认证并上市，成为真正的赢家，譬如生产抗原抗体的义翘、生产分子诊断用酶的翊圣、生产探针的捷瑞、生工，生产诊断试剂盒的华大、硕世、万孚、圣湘等企业。建立生产与质控体系非一日之功，没有胜出的企业，需要反思自身在体系建设上的不足，积极改进，以布局未来之路。